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藥靶細(xì)胞株 > kinase激酶細(xì)胞株 > CBP73352EML4-ALK V1 L1196M/L1198F/BaF3 kinase

EML4-ALK V1 L1196M/L1198F/BaF3 kinase
名稱 EML4-ALK V1 L1196M/L1198F/BaF3 kinase
型號(hào) CBP73352
報(bào)價(jià)
特點(diǎn) EML4-ALK V1 [L1196M/L1198F]/BaF3
  • 詳細(xì)內(nèi)容

EML4-ALK V1 L1196M/L1198F/BaF3 kinase     EML4-ALK V1 L1196M/L1198F/BaF3 kinase         EML4-ALK V1 L1196M/L1198F/BaF3 kinase

I. Background

      棘皮微管相關(guān)蛋白(Echinoderm microtubule-associated protein,EMAP)在海膽中表達(dá), 是第一個(gè)被鑒定的 EMAP 樣蛋白(EML)家族成員。它是海膽卵微管(MT)制劑的主要成分, 也被發(fā)現(xiàn)在間期和有絲分裂時(shí)與微管蛋白共定位。

      ALK 是胰島素受體超家族的一員,在間變性大細(xì)胞淋巴瘤中通過(guò)與核磷蛋白 (NPM)融合發(fā)現(xiàn)。癌細(xì)胞中的 ALK 信號(hào)傳導(dǎo)通過(guò)三種主要機(jī)制發(fā)生:基因融合、基因 擴(kuò)增和點(diǎn)突變。

      在肺癌中檢測(cè)到的第一個(gè)致癌融合是 EML4-ALK,由 2 號(hào)染色體短臂上的一個(gè)小倒位 產(chǎn)生,促進(jìn) EML4 N 末端與 ALK(外顯子 20)的融合。一旦 EML4 中的斷點(diǎn)出現(xiàn)在不同 的外顯子(2、6、13、14、15、18 和 20)中,EML4-ALK 融合蛋白就會(huì)呈現(xiàn)多種變體。 其中 EML4-ALK 融合中最常見的變體亞型為 V1 和 V3a/b,約占所有 EML4-ALK 融合突變 的 70%。不同 EML4-ALK 變體的表達(dá)可能會(huì)影響對(duì) ALK TKI 的反應(yīng),從而影響繼發(fā)性耐 藥特異性 ALK 突變的發(fā)展傾向。EML4 與 ALK 激酶結(jié)構(gòu)域的融合導(dǎo)致異常信號(hào)傳導(dǎo),從 而增加細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖和細(xì)胞存活。在 NSCLC 患者的 ALK 中檢測(cè)到的點(diǎn)突變約占觀察到 的耐藥機(jī)制的三分之一,其中最常見的是 p.L1196M(類似于 EGFR 的 p.T790M)。其他確 定的突變有 p.1151Tins、p.L1152R、p.C1156Y、p.I1171T、p.F1174L、p.V1180L、p.G1202R、 p.D1203N、p.S1206Y 和 p.G1269A 。這些突變?cè)黾恿思っ甘荏w與 ATP 的親和力,降 低了 TKI 的結(jié)合親和力。ALK 基因突變,例如 p.1151Tins 和 p.G1202R,導(dǎo)致對(duì)第二代 ALK TKI 產(chǎn)生耐藥性;p.L1196M 和 p.L1152R 賦予對(duì)第二代和第三代 ALK TKI 的敏感性; p.G1202R 導(dǎo)致對(duì)第一代和第二代 ALK TKI 產(chǎn)生耐藥性。

 
II. Description

      BaF3(小鼠原 B 細(xì)胞)的生長(zhǎng)和增殖需要 IL-3 的維持。通過(guò)引入各種表達(dá)激酶的基因, 能作為 BaF3 的驅(qū)動(dòng)基因,讓 BaF3 不再依賴 IL-3 而增殖,進(jìn)而激酶基因成為 BaF3 增殖依 賴的驅(qū)動(dòng)基因,用于評(píng)估小分子藥物對(duì)激酶的靶向抑制作用,原理及流程見下圖所示。
 

EML4-ALK V1 L1196M/L1198F/BaF3 kinase

Figure 1. EML4-ALK V1 [L1196M/L1198F] BaF3 細(xì)胞的構(gòu)建原理圖

 
III. Introduction
Cell Line Name:EML4-ALK V1 [L1196M/L1198F]/BaF3
Host Cell:Ba/F3
Stability:16 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Application:Anti-proliferation assay and PD assay
Freeze Medium:90% FBS+10% DMSO
Complete Culture Medium:RPMI-1640+10%FBS
Mycoplasma Status:Negative
 
IV. Representative Data

1. Sanger of EML4-ALK V1 [L1196M/L1198F]/BaF3

EML4-ALK V1 L1196M/L1198F/BaF3 kinase

Figure 2. EML4-ALK V1 [L1196M/L1198F]/BaF3 Fusion

EML4-ALK V1 L1196M/L1198F/BaF3 kinase

Figure 3. EML4-ALK V1 [L1196M/L1198F]/BaF3 L1196M+L1198F

2. Anti-proliferation assay

EML4-ALK V1 L1196M/L1198F/BaF3 kinase

Figure 4. CTG Proliferation Assay of EML4-ALK V1 [L1196M/L1198F] BaF3(C1).


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